国家标准规定每毫升酸奶产品中乳酸菌菌数不得低于1×106.为了解某酸奶中的乳酸菌含量是否达到国家标准,某兴趣小组进行了如下实验,请回答下列问题:
(1)制备培养基:培养基的碳源为___________(填“含碳无机物”或“含碳有机物”).检测培养基灭菌是否合格的方法是________________________________________.
(2)样品稀释:若要先将样品稀释10倍,可用无菌移液管吸取5mL酸奶样品加入盛有__mL无菌水的三角瓶中,使样品与水充分混匀.然后进行系列稀释操作,得到稀释至106、107、108倍的样品.
(3)培养与统计:吸取不同稀释度的样品各1mL,分别置于不同培养皿内,加入适宜温度的溶化状态的培养基,使之混合均匀,冷却成平板.每个稀释度做3个重复.在适宜条件下培养一段时间后,对平板的菌落数进行统计,结果如表:
为了保证结果准确,应选择上述稀释度为______倍的平板菌落数作为统计结果,计算出样品中每毫升乳酸菌数为____________.
(4)测定微生物的数量常采用的接种方法是_____________________,其统计的数值往往比实际数目_______.
【答案】含碳有机物取若干灭菌后未接种的培养基(或空白平板)培养一段时间,观察是否有菌落生长451077.4×108稀释涂布平板法低
【解析】1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐,此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求.对异养微生物来说,含C、N的化合物既是碳源,也是氮源,即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。
2、稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后,均匀涂布在培养皿表面,经培养后可形成单个菌落.由于两个或多个细胞连在一起,观察到的只是一个菌落,因此其统计的数值往往比实际数目偏低。
(1)根据题意可知,该实验目的为了解某酸奶中的乳酸菌含量是否达标,而乳酸菌属于异养型生物,因此培养基的碳源为含碳有机物。检测培养基灭菌是否合格,可取若干灭菌后未接种的培养基(或空白平板)培养一段时间,观察是否有菌落生长。
(2)先将样品稀释10倍,即酸奶样品体积:无菌水体积=1:9,即可用无菌移液管吸取5mL酸奶样品加入盛有5×9=45mL无菌水的三角瓶中,使样品与水充分混匀。
(3)稀释涂布平板法进行计数时,应选择30﹣300的菌落数进行计数,因此应选择上述稀释度为107倍的平板菌落数作为统计结果,计算出样品中每毫升乳酸菌数=(78+70+74)÷3×107=7.4×108。
(4)测定微生物的数量常采用稀释涂布平板法,由于两个或多个细胞连在一起,观察到的只是一个菌落,因此其统计的数值往往比实际数目低。